生化試劑的校準(zhǔn)與結(jié)果溯源性

酶的校正要滿(mǎn)足在同一方法學(xué)、同一測(cè)定條件、與理論計(jì)算的FACTOR值差異不大，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)有明顯影響因素，方可進(jìn)行校正。檢驗(yàn)結(jié)果溯源性，得建立一個(gè)可靠的參考系統(tǒng)作為準(zhǔn)確性基礎(chǔ)，然后將準(zhǔn)確性轉(zhuǎn)移到常規(guī)方法測(cè)定中去，使常規(guī)方法測(cè)定結(jié)果可溯源到參考系統(tǒng)所提供的準(zhǔn)確性基礎(chǔ)上來(lái)。在實(shí)現(xiàn)溯源性目標(biāo)過(guò)程中，永遠(yuǎn)以患者新鮮標(biāo)本為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，以方法學(xué)對(duì)比試驗(yàn)方法為驗(yàn)證手段。方法學(xué)對(duì)比試驗(yàn)常采用回歸方程進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，假如斜率接近1，截距較小，這意味著實(shí)驗(yàn)室常規(guī)方法對(duì)標(biāo)本測(cè)定結(jié)果和溯源目標(biāo)參考系統(tǒng)對(duì)標(biāo)本...

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如何進(jìn)行細(xì)胞周期的測(cè)定

一、原理細(xì)胞周期指細(xì)胞一個(gè)世代所經(jīng)歷的時(shí)間.從一次細(xì)胞分裂結(jié)束到下一次分裂結(jié)束為一個(gè)周期.細(xì)胞周期反應(yīng)了細(xì)胞增殖速度.單個(gè)細(xì)胞的周期測(cè)定可采用縮時(shí)攝影的方法,但它不能代表細(xì)胞群體的周期,故現(xiàn)多采用其他方法測(cè)群體周期.測(cè)定細(xì)胞周期的方法很多,有同位素標(biāo)記法,細(xì)胞計(jì)數(shù)法等,這里介紹一種利用BrdU滲入測(cè)定細(xì)胞周期的方法.BrdU（5-溴脫氧尿嘧啶核苷）加入培養(yǎng)基后,可做為細(xì)胞DNA復(fù)制的原料,經(jīng)過(guò)兩個(gè)細(xì)胞周期后,細(xì)胞中兩條單鏈均含BrdU的DNA將占l/2,反映在染色體上應(yīng)表現(xiàn)為...

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抗體按理化性質(zhì)和生物學(xué)功能分類(lèi)

抗體按理化性質(zhì)和生物學(xué)功能，可將其分為IgM、IgG、IgA、IgE、IgD五類(lèi)。1、IgM抗體是免疫應(yīng)答中首先分泌的抗體。它們?cè)谂c抗原結(jié)合后啟動(dòng)補(bǔ)體的級(jí)聯(lián)反應(yīng)。它們還把入侵者相互連接起來(lái)，聚成一堆便于巨噬細(xì)胞的吞噬;2、IgG抗體激活補(bǔ)體，中和多種毒素。IgG持續(xù)的時(shí)間長(zhǎng)，是*能在母親妊娠期穿過(guò)胎盤(pán)保護(hù)胎兒的抗體。他們還從乳腺分泌進(jìn)入初乳，使新生兒得到保護(hù);3、IgA抗體進(jìn)入身體的黏膜表面，包括呼吸、消化、生殖等管道的黏膜，中和感染因子。還可以通過(guò)母乳的初乳把這種抗體輸送到...

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細(xì)胞凍存和復(fù)蘇原則及程序

一、凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍快融當(dāng)細(xì)胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細(xì)胞器脫水，細(xì)胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細(xì)胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細(xì)胞逐步脫水，細(xì)胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反結(jié)晶就大，大結(jié)晶會(huì)造成細(xì)胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過(guò)程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。二、標(biāo)準(zhǔn)程序當(dāng)溫度在-25℃以上時(shí)，1～2℃/min當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí)，5～10℃/min，當(dāng)溫度達(dá)-100℃時(shí)，可迅速放入液氮中三、簡(jiǎn)易程序?qū)龃婀埽ü芸谝希┓湃爰啿即鼉?nèi)，紗...

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ELISA操作之標(biāo)本的采取和保存、保溫

一、標(biāo)本的采取和保存大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)注意避免溶血，紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì)，HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中，以溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。一般說(shuō)來(lái)，在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃，標(biāo)本在冰箱中保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致血清IgG聚合，使間接法的試劑本底加深。超過(guò)一周測(cè)定的需－20℃保存。凍結(jié)血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均...

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單克隆抗體的應(yīng)用　

單克隆抗體問(wèn)世以來(lái)，由于其*的特征已迅速應(yīng)用于醫(yī)學(xué)很多領(lǐng)域。主要表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面。1．檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)診斷試劑作為檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的診斷試劑，單克隆抗體以其特異性強(qiáng)、純度高、均一性好等優(yōu)點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、放射免疫分析、免疫組化和流式細(xì)胞儀等技術(shù)。并且單克隆抗體的應(yīng)用，很大程度上促進(jìn)了商品化試劑盒的發(fā)展。目前，應(yīng)用單克隆抗體制作的商品化試劑盒廣泛應(yīng)用于：①病原微生物抗原、抗體的檢測(cè)；②腫瘤抗原的檢測(cè)；③免疫細(xì)胞及其亞群的的檢測(cè)；④激素測(cè)定；⑤細(xì)胞因子的測(cè)定。單克隆抗體對(duì)抗...

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玻璃儀器清洗規(guī)程

1、試管、燒杯、漏斗等玻璃儀器如無(wú)特殊要求，用洗衣粉刷洗內(nèi)壁，自來(lái)水沖凈后，純凈水潤(rùn)洗三次，以?xún)?nèi)壁不掛水珠為準(zhǔn)，自然晾干。有效期為七日，過(guò)期后使用時(shí)重新洗滌。2、液相色譜、氣相色譜使用的進(jìn)樣瓶洗滌方法和原則與滴定管相同。3、效價(jià)用雙碟用完后，先浸入來(lái)蘇水中24h，取出超聲20分鐘，自來(lái)水逐個(gè)沖凈，純凈水潤(rùn)洗后，以碟上不掛水珠為準(zhǔn)自然晾干，裝入桶內(nèi)。160℃干烤2小時(shí)滅菌備用。有效期為七日，過(guò)期后使用時(shí)重新160℃干烤2小時(shí)即可。4、微生物限度測(cè)定用三角瓶、刻度吸管、試管、雙碟...

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抗體的基因重排

抗體的L鏈?zhǔn)怯蒀、V、J三個(gè)基因簇編碼的，H鏈由C、V、D、J四個(gè)基因簇編碼的。是編碼可變區(qū)，300個(gè)種類(lèi)；編碼高變區(qū),有15～20個(gè)種類(lèi)；編碼連接V、V有DJC的結(jié)合區(qū)，4～5個(gè)種類(lèi)；編碼恒定區(qū)，有C僅有一種。這些外顯子通過(guò)多種多樣的重排，所合成出的肽鏈，還要再進(jìn)一步進(jìn)行L和H鏈組合，這樣zui后生成的抗體種類(lèi)就非常多了。抗體基因重排是發(fā)生在淋巴細(xì)胞分化的時(shí)候。按理化性質(zhì)和生物學(xué)功能，可將其分為IgM、IgG、IgA、IgE、IgD五類(lèi)。1、IgM抗體是免疫應(yīng)答中首先分泌的...

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